木瓜蛋白酶,是一種蛋白水解酶,可將抗體分子水解為3個片段。是番木瓜中含有的一種低特異性蛋白水解酶,活性中心含半胱氨酸,屬巰基蛋白酶,應用于啤酒及食品工業(yè)。
特點
木瓜蛋白酶papain屬巰基蛋白酶,具有較寬的底物特異性,作用于蛋白質中L-精氨酸、L-賴氨酸、甘氨酸和L-瓜 氨酸殘基羧基參與形成的肽鍵。此酶屬內肽酶,能切開全蛋蛋白質分子內部肽鏈—CO—NH—生成分子量較小的多肽類。 存在于木瓜胚乳中的蛋白酶。EC3.4.22.2。作為植物來源的蛋白酶來說,此酶研究進展的最快。此酶主要是以內肽酶的形態(tài)起作用。活性的產生,而半胱氨酸殘基是不可缺少的,所以是硫基蛋白酶的一種,底物的特異性不太嚴格,分子量為23400,氨基酸殘基數212?! ?br />
木瓜蛋白酶是一種在酸性、中性、堿性環(huán)境下均能分解蛋白質的蛋白酶。它的外觀為白色至淺黃色的粉末,微有吸濕性。
酪蛋白被木瓜蛋白酶降解生成的酪氨酸在紫外光區(qū) 275nm 處有吸收峰?! ?br />
木瓜蛋白酶(Papain)簡稱木瓜酶,又稱為木瓜酵素。是利用未成熟的番木瓜(Carica papaya)果實中的乳汁,采用現代生物工程技術提煉而成的純天然生物酶制品。它是一種含巰基(-SH)肽鏈內切酶,具有蛋白酶和酯酶的活性,有較廣泛的特異性,對動植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有較強的水解能力,同時,還具有合成功能,能把蛋白水解物合成為類蛋白質。溶于水和甘油,水溶液無色或淡黃色,有時呈乳白色;幾乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有機溶劑。最適合PH值6~7(一般3~9.5皆可),在中性或偏酸性時亦有作用,等電點(pI)為8.75;最適合溫度55~65℃(一般10~85℃皆可),耐熱性強,在90℃時也不會完全失活;受氧化劑抑制,還原性物質激活。木瓜蛋白酶由212個氨基酸殘基組成,當用氨基肽酶從N末端水解掉分子中的2/3肽鏈后,剩下的1/3肽鏈仍保持99%的活性,說明木瓜蛋白酶的生物活性集中表現在C末端的少數氨基酸殘基及其所構成的空間結構區(qū)域。
木瓜蛋白酶的應用
1.醫(yī)藥工業(yè)應用:
含有木瓜蛋白酶的藥物,能起到抗癌、腫瘤、淋巴性白血病、原菌和寄生蟲 、結核桿菌等,可消炎、利膽、止痛、助消化。治療婦科病、青光眼、骨質增生、槍刀傷口愈合、血型鑒別、昆蟲叮咬等。
2.食品工業(yè)應用:
可利用酶促反應,使食品大分子的蛋白質水解成小分子肽或氨基酸。用于水解動植物蛋白、制成嫩肉粉、水解羊胎素、水解大豆、餅干松化劑、面條穩(wěn)定劑、啤酒飲料澄清劑、高級口服液、保健食品、醬油釀造及酒類發(fā)酵劑等。有效轉化蛋白質的利用,大大提高食品營養(yǎng)價值,降低成本。有利于人體的消化和吸收。
3.美容化妝品應用:
將木瓜蛋白酶加入到含有蛋白質和油脂的化妝品中,具有獨特的美白嫩膚、美顏保健、祛斑除污垢、促進血液循環(huán)、改善肌膚等功效,提高產品檔次??芍瞥蓽p肥茶、美容護膚品等。4.日化品工業(yè)應用:
用于香皂、肥皂、洗滌劑、洗衣粉、洗手液等,去污力強,除菌消毒、安全放心。
5.飼料工業(yè)應用:
用于飼料添加劑,開發(fā)蛋白源,利于吸收,提高飼料的利用率,節(jié)約成本,有助于牲畜消化,加速生長。如在豬、牛、羊、雞、鴨、鵝、魚、蝦等飼料中添加。還可以作為蔬菜水果高級復合肥料的添加劑。
6.皮革工業(yè)應用:
利用木瓜蛋白酶制成脫毛劑,鞣制皮革,具有毛孔細膩,皮紋光亮效果?! ?br />
紡織工業(yè)應用:可用于處理羊毛、蠶蛹脫膠、蠶絲精煉,能達到手感柔軟、舒適、抗收縮、抗張強度等效果。
7.細胞培養(yǎng):
木瓜蛋白酶在準備細胞培養(yǎng)液(cell culture)的第一步中被用于分離細胞。用酶處理小組織塊10分鐘后,就可以將連接細胞的細胞外基質打斷;然后再用蛋白酶抑制劑來停止反應,防止木瓜蛋白酶進一步裂解細胞本身;最后用Pasteur pipette將組織塊打散為單細胞懸浮液。
8. 免疫學:
在免疫學中,木瓜蛋白酶可被用于將免疫球蛋白(即抗體)的Fc片段(可結晶)和Fab片段(抗原結合)切割開。
產地
在我國,木瓜種植主要分布在廣西的橫縣和邕寧縣等地,屬于廣西特產水果,因此,木瓜蛋白酶生產廠家主要集中在廣西南寧市,木瓜蛋白酶的生產和研究有將近20年的時間。催化機制木瓜蛋白酶的剪切肽鍵的機制包括:在His-159作用下Cys-25去質子化,而Asn-158能夠幫助His-159的咪唑環(huán)的擺放,使得去質子化可以發(fā)生;然后Cys-25親核攻擊肽主鏈上的羰基碳,并與之共價連接形成?;钢虚g體;接著酶與一個水分子作用,發(fā)生去?;?,并釋放肽鏈的羰基末端。
生產
通常木瓜蛋白酶是以粗制品形式被生產,主要來源是從木瓜樹的果實中提取乳液(latex)后制成的干貨。乳液是通過割果實的頸部進行收集,或直接在果實上風干,或滴入容器中。風干后的乳液就是木瓜蛋白酶的粗制品。若需對其進行進一步的純化以除去雜質,就要先溶解粗制品,并用一個標準的過程(政府注冊)進行提純。純化后的木瓜蛋白酶可以制為干粉或液體。